转基因水稻基体标准物质候选物真实性的鉴定技术研究

doi:10.3969/j. issn. 1000-1158.2014.05.21

摘要
图/表
参考文献(12)
相关文章 (15)

全文: PDF (803 KB) HTML (1 KB)
输出: BibTeX | EndNote (RIS)

摘要 PCR技术及琼脂糖凝胶电泳技术为基础，对转基因水稻克螟稻2号和阴性受体秀水11进行真实性鉴定。利用典型性检测、指纹图谱技术对候选物的转基因事件的真实性、转入事件正确性(是否为特异性目标外源基因）、品系遗传背景进行鉴定，结果表明，克螟稻2号只含特异性序列CrylAb，秀水11不含所选的外源基因，它们具有相同的遗传背景。随机各抽取克螟稻2号和秀水11水稻100株，通过特异性PCR、免疫印迹实验来检测原材料的纯度，结果表明，克螟稻2号为100%的转基因水稻，秀水11为100%的阴性受体水稻。

	服务

	把本文推荐给朋友
	加入我的书架
	加入引用管理器
	E-mail Alert
	RSS
	作者相关文章
	余笑波
	应荣
	俞晓平
	崔海峰
	王晶
	隋志伟
	李亮
	臧超
	叶子弘

关键词 ：计量学, 转基因水稻, 基体标准物质, 品系鉴定, 纯度鉴定, 指纹图谱技术

Abstract：Based on PGR and agarose gel electrophoresis, the authenticity of identification of transgenic rice KMD 2 and negative receptor Xiushui 11 is researched. The detection of special transgenic gene and other foreign genes in raw materials is by typicality identification. No other foreign genes are detected except special foreign gene Gryl Ab in transgenic rice KMD 2, and no foreign genes is detected in Xiushui 11. Based on fingerprint technology, including Xiushui 11 and KMD 2 there are 20 rice varieties, and the results showed that Xiushui 11 and KMD 2 have the same fingerprint and also be different from other 18 rice varieties. Random sampling for KMD 2 and Xiushui 11，and take special PGR and immunoblotting technique for the selected samples purity, KMD 2 are 100% transgenic rice and Xiushui 11 are 100% negative receptors rice.

Key words： Metrology Transgenic rice Matrix reference materials Line identification Purity identification Fingerprint technique

基金资助:国家自然科学基金(31000357)_;国家科技支撑计划项目（2012BAD27B01)_;浙江省自然科学基金（Y3090173)_;浙江省公益项目 (2014C32022);浙江省重点创新团队(2010R50028)

作者简介: 余笑波（1985 -)，男，浙江台州人，中国计量学院硕士，主要从事生物中核酸计量研究。yuxiaobo.123@163. com

引用本文:

余笑波,应荣,俞晓平,崔海峰,王晶,隋志伟,李亮,臧超,叶子弘. 转基因水稻基体标准物质候选物真实性的鉴定技术研究[J]. 计量学报, 2014, 35(5): 512-516.
YUXiao-bo,YINGRong,YUXiao-ping,CUIHai-feng,WANGJing,SUIZhi-wei,LILiang,ZANGChao,YEZi-hong. Research on Identification Technique for Raw Materials of Matrix Reference Materials of Transgenic Rice. Acta Metrologica Sinica, 2014, 35(5): 512-516.

链接本文:

http://jlxb.china-csm.org:81/Jwk_jlxb/CN/10.3969/j. issn. 1000-1158.2014.05.21 或 http://jlxb.china-csm.org:81/Jwk_jlxb/CN/Y2014/V35/I5/512

[1] 高运华，黎朋，刘张岚，等.转基因水稻标准物质的研制[J].计量学报，2010,31(5Α): 14-18.

[2] 傅博强，臧超，宋贵文，等.转基因玉米ΜΟΝ810基体标准物质Q-PCR量值协同实验室研究[J].计量学报，2011，32(6Α) : 114-118.

[3] 施勇烽，应杰政，王磊，等.鉴定水稻品种的微卫星标记筛选[J].中国水稻科学，2005,19(3): 195 -201.

[4] 张彦，郭士伟，何冰，等.利用SSR标记建立杂交水稻分子指纹图谱数据库[J].江苏农业学报，2006, 22 (2) ： 181 -183.

[5] 余笑波，叶子弘，隋志伟，等.转基因水稻克螟稻标准物质的初制备[J].计量学报，2011，32(6Α): 101 -105.

[6] 谢家建，王锡锋，彭于发.转基因水稻品系克螟稻2 号1的外源插入片段的旁侧序列：中国，101240278Α [Ρ]. 2008-08-13.

[7] 卢长明，吴刚，武玉花，等.转基因水稻ΤΤ51-1转化事件外源载体整合位点全序列及应用：中国， 101302520Α[ Ρ]. 2008-11-12.

[8] 谢家建，王锡锋，彭于发.转基因水稻品系科丰6号的外源插入片段的旁侧序列：中国，101240279Α [ Ρ]. 2008-08-13.

[9] Rene Koppel, Franziska Zimmerli, Alda Breitenmoser. Multiplex real-time PGR for the simultaneous detection and quanti Wcation of DNA from three transgenic rice species and construction and a pplication of an artiW cial oligonucleotide as reference molecule [ J ]. Eur Food Res Technol, 2010, 230： 731 -736.

[10] Jiang L, Yang L, Zhang H, et al. International collaborative study of the endogenous reference gene, sucrose phosphate synthase ( SPS) , used for qualitative and quantitative analysis of genetically modified rice [ J ]. J Agric Food Chem,2009, 57 (9) ： 3525 -3532.

[11] GB/T 20396—2006三系杂交水稻及亲本、真实性和品种纯度鉴定DNA分析方法[S].

[12] 程保山.SSR标记在粳稻恢复基因Rf-Ι转育、^纯度和品种鉴定中的应用[D].南京：南京农业大学， 2007.